真菌结构复杂,种类繁多,包括酵母(样真)菌、丝状真菌(霉菌)等,除少数为单细胞形式外,大多数由多细胞组成。

一、真菌的形态与结构

(一)酵母样真菌

多呈圆形、卵圆形、香肠形与杆状等,大小差异很大,5~30微米×1~5微米,不形成真正的菌丝,但如念珠菌属(又称假丝酵母属)的菌形成的芽体可依次连接成丝状的假菌丝(图1-4)。酵母菌外层为坚韧的细胞壁,向内依次是细胞膜与细胞质。细胞核由核膜包裹,在细胞质中各种细胞器（图1-5）。

在固体培养基上，酵母菌菌落与一般细菌菌落相似，通常表面光滑，湿润，边缘整齐。能形成假菌丝的菌，其假菌丝伸入基质。

(二)丝状真菌(霉菌)

丝状真菌由菌丝与孢子两部分组成。菌丝由孢子生出的芽管再延伸成丝状而成,有螺旋状、球拍状与鹿角状等多种形态,直径约3~10微米。菌丝继续生长分枝并交织成丛,即为菌丝体。密布在营养基质内部的、行吸收营养物质功能的称营养菌丝体;而伸到空气中的则称为气生菌丝体,其中能产生孢子的又称为繁殖菌丝体。有些真菌菌丝具有隔膜,将菌丝分为若干细胞,称为隔膜菌丝,具多细胞;反之,有些无隔膜的菌丝则为单细胞,在真菌分类鉴定上这是依据之一。孢子是真菌的繁殖器官,具有小、轻、干、多及形态色泽多样、休眠期长和抗逆强等特征;每个个体产生的孢子成千上万。这些特征均有助于真菌在自然界散播繁殖。

霉菌菌落形态较大、干燥、不透明、呈松紧不一的蛛网状、绒毛状或棉絮状,与培养基连接紧密,不易挑取,菌落中心与边缘、正面与反面的色泽不一致。

二、真菌的繁殖

真菌的孢子形成是其最重要的繁殖方式,根据孢子形成过程中有无核的融合可分为有性孢子与无性孢子两类。

1.无性孢子  无性孢子繁殖是指孢子形成无核融合过程,诸如叶状孢子由菌丝直接形成孢子,包括芽生孢子厚垣孢子和关节孢子;分生孢子是指在分化的、专门的菌丝上形成的孢子,可分小分生孢子

和大分生孢子两种;孢子囊孢子则是由菌丝末端的孢子囊内形成的孢子。

2.有性孢子  指在孢子的形成中有细胞核融合过程,例如接合孢子是由两条形体相似、性别不同的菌丝相互接触,隔膜消失后细胞核融合形成;卵孢子是由两条大小不同的菌丝,分化为雄性的雄器(形体较小)和雌性的藏卵器(形体较大),结合发育形成孢子;子囊孢子则由两个真菌汇合成子囊,在核融合后再分裂形成担孢子是在菌丝形成的膨大结构的末端形成的外出性有性孢子。

三、真菌的分类

通用的真菌分类法将真菌分为4个纲,其特征如下。

(一)藻状菌纲

菌丝不分隔或不形成真正的菌丝体,细胞内含有许多细胞核,具有性生殖阶段,有性孢子分为接合孢子和卵孢子,无性繁殖的孢子囊孢子形成于孢子囊内,如毛霉菌、根霉菌等。

(二)子囊菌纲

菌丝分隔,有性阶段形成子囊孢子,如麦角菌等。

(三)担子菌纲

菌丝分隔,有性阶段形成担子菌,如锈菌、黑粉菌等。

(四)不完全菌纲

不完全菌纲又称半知菌纲,菌丝分隔,仅有无性繁殖阶段,未发现有性孢子,引起动物和人疾病的真菌多属此纲。其中主要是毛癣菌属、曲霉菌属、念珠菌属与小孢子菌属等(图1-6)其对外界有极强的抵抗力,对一般消毒剂耐受性很强。

四、真菌的培养

真菌对营养物质要求不严格,培养基中应含有较多的糖类,需氧,最适pH多在4~6之间,适宜温度为22~28℃,生长较慢约需数日至十数日方能长成典型菌落。常用的固体培养基为琼脂培养基,多用于分离培养、菌种保存和研究等。常用的液体培养方法有浅层法与深层通气法,后者可满足生长所需的氧气,多用于生产。

五、真菌病的微生物学检查

真菌病多为慢性经过,由于真菌侵害部位不同而有浅在侵害性真菌病与深在侵害性真菌病之分。常见的致病性真菌有表皮癣菌属、小孢癣菌属、毛癣菌属、白色念球菌、新型隐球菌、组织胞浆菌、孢子丝菌、芽生菌等。

真菌病的诊断检查主要是对真菌的形态特征的鉴定,有些真菌病也可用免疫学方法检查诊断。

(一)病料采取

检查用病料应根据疾病特点选取,诸如被毛、皮肤刮取物、脓汁、分

泌物、体液、排泄物、胎儿胃内容物和器官组织等均可用作检查病料标本。

(二)显微镜检查

1.湿标本片检查

(1)水滴压片法于标本上滴加普通水,加上盖玻片制成压片,于镜下直接检查,但不多用。

(2)氢氧化钾处理片法多用于脓汁、痰液、被毛、角质等病料标本。于标本上滴加10%~20%氢氧化钾溶液,加上盖玻片后作微热处理,然后镜检。

(3)乳酸石炭酸棉蓝液压片法于标本上滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液,加上盖玻片镜检,如用针梳理后加盖玻片镜检测更加清晰。本法常用于实验室。

(4)印度墨汁片法多用以检查一些真菌(新型隐球菌等)的荚膜。

2.涂片染色片检查   取浓汁、分泌物、组织及病料离心沉淀物涂片,用姬姆萨染色法等按常规染色后镜检,可见到真菌细胞、菌丝、孢

子等结构。

(三)分离培养

取病料标本接种于加有青霉素20~100国际单位/毫升、链霉素40~200微克/毫升的沙氏或改良沙氏培养基,有些深部感染病料还要同时接种血琼脂培养基,分别置于室温和37℃下培养并逐日观察数日至数周。然后,挑取菌落作涂(抹)片镜检。